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Evaporer comment une solution d'ADN

Evaporer comment une solution d'ADN


L'ADN est un ingrédient nécessaire dans un laboratoire où l'objet de l'étude est la génétique ou la transcription des protéines, car il est de l'ADN que les gènes sont transcrits. Lorsque l'ADN est extrait de bactéries ou de mammifères, parfois, les résultats donnent un faible rendement. Lorsque la concentration d'ADN est trop faible dans la solution finale produite à partir de l'extraction, il est inefficace dans les expériences ultérieures et doit être lyophilisé et reconstitué pour accroître sa concentration. Reconstitution signifie ajouter de l'eau. L'évaporation de l'ADN sans le contaminer nécessite plus d'attention et est l'étape clé de succès concentration d'ADN augmente.

Il y a deux méthodes courantes d'évaporation de solutions d'ADN. L'évaporation dans un tube nécessite l'ajout d'un sel pour créer une pastille d'ADN, mais il est préférable pour les plasmides d'ADN ou de petits segments parce qu'ils ne coagulent pas beaucoup. L'évaporation sur une tige de verre qui fonctionne le mieux pour l'ADN génomique à partir d'échantillons de mammifères parce que cet ADN est souvent plus épais et peut être soigneusement ramassé avec un instrument terne.

Instructions

Verre Méthode Rod

1 Doubler le volume de la solution d'ADN par addition d'éthanol à 100% égal au volume de la solution d'ADN.

2 Trempez la tige de verre avec précaution dans la solution d'ADN génomique remuer lentement. Évitez émulsionner le mélange. L'ADN est contenue dans l'interface entre l'éthanol et la solution d'ADN d'origine.

3 Faites tourner la tige doucement entre le pouce et l'index pour tordre l'ADN autour de la tige.

4 Retirer la tige. Sur la fin de celui-ci devrait être quelque chose qui semble claire et visqueuse. C'est l'ADN.

5 Poser la tige à travers une seconde tige de verre d'une manière perpendiculaire donc il ne touche pas la table.

6 Couverture de l'ADN sur la tige pour la protéger tout en séchant.

sel Méthode

7 Ajouter 10% du volume total de la solution d'ADN de la solution de chlorure de sodium pour regrouper l'ADN.

8 Tapotez doucement le tube avec un index pour mélanger la solution d'ADN avec le sel.

9 Tripler le volume total de la solution par addition de 100% d'éthanol. À ce stade, l'ADN est souvent clairement visible à l'oeil nu.

dix Isoler l'ADN dans le tube en utilisant une centrifugeuse à vitesse maximale pendant 30 secondes.

11 Jeter le surnageant.

12 Ajouter un volume de la solution d'ADN d'origine de 70% d'éthanol pour rincer le sel. Jeter le rinçage à l'éthanol, en conservant le culot. Si la pastille devient délogé du fond du tube, tourner à nouveau dans la centrifugeuse à pleine vitesse pendant 30 secondes.

13 Répétez l'étape 6 deux fois de plus.

14 Sécher le tube en lui permettant de reposer sur son côté où il ne sera pas perturbé.